Выделение ДНК из репчатого лука
Всем привет. Меня зовут Сергей и сегодня расскажу вам как в лабораторных условиях можно выделить ДНК из привычного всем нам репчатого лука.
*
Для получения необходимого результата нам подойдет любой репчатый лук, но какого бы цвета он не был. Cначала нам нужно нарезать лук. Нас устроит любая форма нарезанного лука: кубики это будут или колечки значения для нас не имеет. Далее взвешиваем необходимую навеску лука на весах - 5 г.
Затем лук смешиваем с буферным раствором, объем которого равeн 10 мл. Рецепт буферного раствора таков:
- Додецилсульфат натрия (С12Н25SO4Na)- 0.5 г;
- Хлорид натрия (NaCl) - 0.8 г;
- Цитрат натрия (Na3C6H5O7) - 0.5 г;
- Этилендиаминтетрауксусная кислота ((HOOCCH2)2N(CH2)2N(CH2COOH)2) - 0.029 г.
Смешивание необходимо производить в стакане. Затем ставим полученную смесь на водяную баню на 15 минут при t=30°С.
После охлаждаем смесь в ёмкости со льдом до 15-20°С. Засекаем 6 минут. Ждём. Далее полученное необходимо гомогенизировать в гомогенизаторе (я когда-нибудь покажу вам как он выглядит) сначала на низкой скорости (500 оборотов), потом на высокой (1500 оборотов) в течение 45 секунд. Для лучшей гомогенизации в смесь лука и буферного раствора необходимо положить несколько металлических шариков.
Гомогенат (измельченная смесь лука и буферного раствора) вновь ставим на лёд, но теперь уже 15 минут и затем фильтруем его через 4 слоя марли. Получается луковая пенка.
Полученный фильтрат необходимо в третий раз "остудить" с помощью льда в течение 10 минут, а затем осадить 95% этанолом. Достаточно будет 8 мл. Получается вот такая красивая луковая ленточка, на которую можно любоваться сверху.
Её можно либо намотать на стеклянную палочку и рассмотреть поближе либо (если ДНК ещё понадобится) перенести её в лабораторную посуду и поставить в холодильник. Для хранения ДНК я использовал пенициллиновую баночку. В ней ДНК выглядит менее впечатляющей.
На этом всё. До встречи.
Материал подготовлен командой @sci-populi, автор @sergesfnv.
Этот текст публикуется от лица нового естественно-научного сообщества в рамках Vox Populi — @vp-science, которое будет запущено в ближайшее время. В новое сообщество приглашаются авторы, интересы которых лежат в области естественных наук, таких как — физика, химия, биология, геология и так далее. Так как создание нового сообщества в рамках @vox-populi на данный момент длится достаточно долго, то на начальном этапе тексты естественно-научной направленности будут публиковаться с аккаунта @vp-cosmos — мы уверены, что это как минимум не причинит неудобств, а, вполне возможно, будет даже интересно для нашей аудитории.